ELISA試劑盒實用小竅門,值得看看!
ELISA試劑盒實用小竅門,值得看看!
1. 標本及收集、貯運要素
① 嚴峻溶血:以HRP為標記的ELISA測定中,殘留在孔內(nèi)的血紅蛋白具有過氧化物酶樣活性,催化底物顯色構成假陽性;
② 混有紅細胞的血清易沉積或附著在聚乙烯孔內(nèi)不易洗凈
③ 如有**污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會發(fā)生假陽性反響;
④ 標本凝結不全,有時為了爭取時刻快速檢測,常在血液還未開端凝結時即強行離心分離血清,使血清中仍殘留部分纖維蛋白原,在ELISA測定過程中可以構成肉眼可見的纖維蛋白塊,易構成假陽性成果;
⑤ 采血試管洗刷不完全、重復運用易穿插污染
⑥ 塑料試管能吸附抗原物質(zhì) ,樣本久置在塑料管內(nèi)會使樣本內(nèi)抗原含量下降構成假陰性。
血清標本宜在新鮮時檢測,嚴峻溶血標本禁用。一般說來,在5天內(nèi)測定的血清標本可放置于4℃,標本在冰箱中保存時刻過長導致血清IgG 聚合,使間接法的 試劑 本底加深。超過一周測定的需-20℃保存。凍住血清融解后,蛋白質(zhì)部分濃縮,散布不均,應充沛混勻并避免發(fā)生氣泡?;鞚峄蛴谐练e的血清標本應先離心或過濾,澄清后再檢測。重復凍融會使 抗體 效價下跌,所以測 抗體 的血清標本如需保存作屢次檢測,宜少數(shù)分裝冰存。
2. 之操作技術的影響
① 應確保清潔,整個操作過程中確保酶標板不觸摸次氯酸。以上的辦法可以使“花板”降至限度。然后提高檢測的特異性。并得到更**、可靠的試驗成果。
② 合理安排檢丈量,避免反響板過多構成洗板等候時刻長。
③ 加酶試劑后用吸水紙在酶標板外表輕拭吸干。
④ 用洗板機洗板時,確保洗液注滿各孔,洗板針疏通,洗完板后在吸水紙(挑選干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干:還要避免針口有纖維蛋白或異物,這些異物在洗板的過程中易發(fā)生拖帶現(xiàn)象而導致“花板”的呈現(xiàn)。
⑤ 顯色劑盡量在臨用前制造,堅持不必過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不必。
希望以上的ELISA試劑盒試驗有用小竅門可以給您帶來實質(zhì)上的協(xié)助,更多相關試劑盒的材料概況歡迎您。